目 錄
第一篇 形態(tài)學與病理學
第一章 光學顯微鏡技術
第一節(jié) 概說
第二節(jié) 各種顯微鏡的性能和使用
第三節(jié) 顯微照像技術
第四節(jié) 制片技術
第二章 組織化學
第一節(jié) 固定與制片
第二節(jié) 蛋白質、糖類、脂質及核酸組織化學反應
第三節(jié) 酶組織化學
第四節(jié) 免疫組織化學
第五節(jié) 原位核酸分子雜交
第六節(jié) 原位聚合酶鏈反應及其他原位標記技術
第三章 電子顯微鏡技術
第一節(jié) 超薄切片技術
第二節(jié) 掃描電鏡標本制備技術
第三節(jié) 冷凍復型電鏡技術
第四節(jié) 電鏡細胞化學
第五節(jié) 免疫電鏡技術
第六節(jié) 掃描隧道顯微鏡標本制備技術
第七節(jié) 電鏡生物X線微區(qū)分析技術
第四章 定量形態(tài)學
第一節(jié) 研究范圍
第二節(jié) 基本原理
第三節(jié) 樣本的采集及制備
第四節(jié) 測試工具
第五節(jié) 二維圖像參數
第六節(jié) 體視學參數
第七節(jié) 結構成份總量計算
第八節(jié) 數值修約和書寫表達
第九節(jié) 形態(tài)計量學參數的應用
第十節(jié) 定量細胞化學
第十一節(jié) 流式細胞技術
第二篇 細胞生物學
第一章 細胞和器官培養(yǎng)技術
第一節(jié) 人和動物組織的原代培養(yǎng)
第二節(jié) 培養(yǎng)細胞的傳代
第三節(jié) 人皮膚成纖維細胞培養(yǎng)
第四節(jié) 人外周血淋巴細胞培養(yǎng)
第五節(jié) 人羊水細胞培養(yǎng)
第六節(jié) 人絨毛膜細胞培養(yǎng)
第七節(jié) 培養(yǎng)細胞的凍存與復蘇
第八節(jié) 器官培養(yǎng)
第九節(jié) 細胞雜交技術
第二章 細胞生物學研究技術
第一節(jié) 培養(yǎng)細胞增殖動力學分析
第二節(jié) 體外細胞系的建立
第三節(jié) 放射自顯影技術
第四節(jié) 縮時電影顯微照像術
第五節(jié) 培養(yǎng)細胞的顯微注射法
第六節(jié) 細胞骨架及核骨架技術
第三章 細胞分離技術
第一節(jié) 細胞分離的一般技術和注意事項
第二節(jié) 液體樣品中的細胞分離
第三節(jié) 從組織器官分離細胞
第四節(jié) 肝臟灌流分離肝細胞
第五節(jié) 細胞淘洗法
第六節(jié) 細胞電泳分離技術
第四章 細胞通訊研究技術
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 細胞通訊研究方法
第三節(jié) 細胞通訊研究方法的應用和實驗設計
第三篇 生物化學與生物物理學
第一章 層析技術
第一節(jié) 凝膠過濾層析技術
第二節(jié) 離子交換層析技術
第三節(jié) 親和層析技術
第四節(jié) 吸附層析技術
第二章 電泳技術
第一節(jié) 電泳技術的基本原理及電泳類型
第二節(jié) 紙電泳和醋酸纖維素薄膜電泳
第三節(jié) 聚丙烯酰胺凝膠電泳
第四節(jié) 瓊脂糖凝膠電泳
第五節(jié) 等電聚焦
第六節(jié) 細胞電泳
第七節(jié) 毛細管電泳
第八節(jié) Phast系統(tǒng)
第三章 蛋白質分離純化技術
第一節(jié) 利用溶解度差別的分離方法
第二節(jié) 利用分子大小不同的分離純化方法
第三節(jié) 根據蛋白質分子帶電性質不同的分離方法
第四節(jié) 利用蛋白質吸附性質不同的分離方法
第五節(jié) 利用蛋白質的特異性配體分離方法—— 親和層析
第四章 蛋白質分子量測定技術
第一節(jié) 離心技術測定大分子物質的分子量
第二節(jié) 凝膠過濾層析法測定大分子物質的分子量
第三節(jié) 十二烷基硫酸鈉(SDS)-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定大分子物質的分
子量
第五章 蛋白質定量測定技術
第一節(jié) 凱氏定氮法
第二節(jié) 雙縮脲法
第三節(jié) Folin(福林)-酚試劑法(Lowry法)
第四節(jié) 紫外分光光度法
第五節(jié) 考馬斯亮藍G-250染色法
第六節(jié) BCA法
第六章 蛋白質序列分析方法
第一節(jié) 化學分析法
第二節(jié) 測定核苷酸的順序推斷蛋白質的一級結構
第七章 蛋白質折疊、磷酸化、轉運和分泌的研究方法
第一節(jié) 蛋白質折疊
第二節(jié) 蛋白質磷酸化
第三節(jié) 蛋白質的轉運和分泌
第八章 DNA和RNA的提取
第一節(jié) DNA的提取
第二節(jié) DNA濃度測定
第三節(jié) DNA的純化
第四節(jié) DNA溶液的濃縮與儲存
第五節(jié) 細菌基因組DNA的儲備
第六節(jié) RNA的提取
第七節(jié) 從小量樣品中同時提取高分子量DNA和RNA
第九章 酶活力及其動力學常數的測定
第一節(jié) 基本概念
第二節(jié) 酶活力的測定方法
第三節(jié) 同工酶的測活
第四節(jié) Km及Vm的測定
第十章 生物膜研究技術
第一節(jié) 細胞膜的分離及某些成份的生化測定
第二節(jié) 差示掃描量熱技術
第三節(jié) 自旋標記順磁共振波譜技術
第四節(jié) 冰凍斷裂電子顯微鏡技術
第五節(jié) 熒光偏振技術
第六節(jié) 激光拉曼技術
第七節(jié) 核磁共振技術
第八節(jié) 圓二色性技術
第十一章 自由基研究技術
第一節(jié) 生物化學方法
第二節(jié) 化學發(fā)光法
第三節(jié) 自旋捕捉技術
第十二章 細胞外間質成分的實驗技術
第一節(jié) 蛋白多糖和糖胺多糖
第二節(jié) 膠原蛋白
第三節(jié) 彈性蛋白
第四節(jié) 結構糖蛋白
第四篇 分子生物學
第一章 重組質粒
第一節(jié) 質粒DNA的抽提與純化
第二節(jié) 外源DNA片段與質粒載體的重組
第三節(jié) 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備和重組DNA的轉化
第四節(jié) 重組質粒DNA克隆的篩選和鑒定
第五節(jié) 利用粘粒載體構建基因組DNA文庫
第二章 重組噬菌體
第一節(jié)λ噬菌體的培養(yǎng)純化和DNA的提取
第二節(jié) 外源DNA與λ噬菌體載體重組
第三節(jié) 重組λ噬菌體DNA的體外包裝
第四節(jié) 重組λ噬菌體DNA克隆的篩選和分析
第五節(jié) 單鏈絲狀噬菌體M13.的繁殖及其DNA的制備
第三章 大片段DNA分析技術
第一節(jié) 大分子基因組DNA的制備與酶解
第二節(jié) 脈沖場梯度凝膠電泳
第四章 人工酵母染色體克隆
第一節(jié) YAC載體
第二節(jié) 宿主菌
第三節(jié) YAC文庫構建的主要步驟
第四節(jié) YAC克隆的篩選和驗證
第五節(jié) YAC文庫的貯存
第六節(jié) YAC克隆的應用
第七節(jié) 存在問題
第五章 mRNA的純化和分析
第一節(jié) RNA提取
第二節(jié) mRNA純化
第三節(jié)Northern印跡雜交
第四節(jié) DNA酶S1分析
第五節(jié) RNA酶保護分析
第六節(jié)cDNA合成
第七節(jié) mRNA末端分析 -RACE
第八節(jié) 轉錄中止的RNA恢復延伸分析
第六章 cDNA文庫的構建
第一節(jié) 外源雙鏈cDNA的合成與修飾
第二節(jié) 克隆用噬菌體載體
第三節(jié) 雙鏈cDNA的分子克隆
第七章cDNA文庫的篩選和擴增
第一節(jié)cDNA文庫的篩選
第二節(jié)cDNA文庫的擴增
第三節(jié) 遞減雜交
第八章 寡核苷酸引物及探針的制備
第一節(jié) 寡核苷酸探針的設計
第二節(jié) 寡核苷酸的合成
第三節(jié) 寡核苷酸的純化與質量鑒定
第四節(jié) 寡核苷酸的標記
第九章 DNA聚合酶鏈反應(PCR)
第一節(jié) 基本原理與操作
第二節(jié) 未知序列的擴增
第三節(jié) PCR產物直接測序
第四節(jié) PCR體外致突變
第五節(jié) PCR中低效非特異擴增和PCR產物夾帶污染的對策
第六節(jié) 用少量細胞直接進行聚合酶鏈反應
第七節(jié) 干血樣和石蠟包埋組織的PCR方法
第八節(jié) PCR擴增大片段DNA
第十章 DNA限制性內切酶圖譜分析
第一節(jié) 雙酶解法
第二節(jié) DNA一端標記加部分酶解法
第三節(jié) 片段雜交法
第四節(jié) DNA復制法
第五節(jié) 根據全序列推測法
第六節(jié) 雙酶解法操作步驟
第七節(jié) DNA一端標記加部分酶解法操作步驟
第八節(jié) 片段雜交法操作步驟
第十一章 核酸序列分析
第一節(jié) 化學法測定DNA核苷酸序列
第二節(jié) 末端終止法測定DNA核苷酸序列
第三節(jié) RNA核苷酸序列測定簡介
第十二章 重組DNA轉染哺乳類細胞及基因表達產物的檢測
第一節(jié) 哺乳類基因轉移的遺傳選擇標記
第二節(jié) 外源基因導人哺乳類細胞的載體
第三節(jié) 外源DNA導入哺乳類細胞的方法
第四節(jié) 基因表達產物的檢測
第十三章 基因表達調控的研究技術
第一節(jié) 核抽提物的制備
第二節(jié) DNA探針的制備
第三節(jié) 凝膠阻滯分析
第四節(jié) 離體DNaseI足跡分析
第五節(jié) 甲基化保護分析
第六節(jié) 蛋白質-核酸紫外交聯
第七節(jié) 應用生物素/鏈親和素系統(tǒng)純化DNA結合蛋白
第八節(jié) 濾膜結合法分離蛋白結合的DNA
第九節(jié) 編碼DNA結合蛋白的cDNA克隆的檢測、純化和鑒定
第十節(jié) Southwestern印跡雜交
第十一節(jié) DNaseI超敏感位點的測定
第十二節(jié) 氯霉素乙酰轉移酶分析(CAT分析)
第十三節(jié) 熒光素酶檢測系統(tǒng)
第十四節(jié) 轉錄起始位點的測定
第十五節(jié) 體外轉錄體系
第十四章 轉基因動物技術
第一節(jié) 原理和方法
第二節(jié) 儀器試劑
第三節(jié) 實驗動物的規(guī)格和準備
第四節(jié) 操作方法
第五節(jié) 轉基因動物技術中有關的分子生物學實驗方法
第六節(jié) 討論
第五篇 醫(yī)學遺傳學
第一章 細胞遺傳學研究技術
第一節(jié) 實驗室裝備及常規(guī)技術
第二節(jié) 染色體標本制備法
第三節(jié) 高分辨染色體分析
第四節(jié) 染色體脆位點顯示
第五節(jié) 姐妹染色單體交換及微核
第六節(jié) 去透明帶地鼠卵穿透試驗和人精子染色體離體檢測系統(tǒng)
第七節(jié) 建立永久性類淋巴母細胞樣細胞系
第八節(jié) 間期核研究(性染色質)
第九節(jié) 染色體原位雜交
第二章 生化遺傳學研究技術
第一節(jié) 氨基酸代謝病的篩查
第二節(jié) 細菌抑制法測血氨基酸——Guthrie試驗
第三節(jié) 溶酶體酶活性測定
第四節(jié) 粘多糖初篩和35S參人試驗
第三章 分子遺傳學研究技術
第一節(jié) DNA探針的分離和制備
第二節(jié) Southern印跡雜交
第三節(jié) PCR及相關技術在基因診斷中的應用
第四節(jié) 多態(tài)性連鎖分析
第五節(jié) 親子鑒定和個體識別
第六節(jié) 產前診斷與遺傳咨詢
第四章 遺傳毒理學研究技術
第一節(jié) 概述
第二節(jié) 基因突變的測定
第三節(jié) 染色體畸變的檢測
第四節(jié) DNA初級損傷的檢測
第五節(jié) 細胞轉化試驗
第六節(jié) 分子生物學技術在遺傳毒理學中的應用