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蛋白質(zhì)純化與鑒定實(shí)驗(yàn)指南

蛋白質(zhì)純化與鑒定實(shí)驗(yàn)指南

定 價(jià):¥45.00

作 者: (美)D.R.馬歇克(D.R.Marshak)等著;朱厚礎(chǔ)等譯
出版社: 科學(xué)出版社
叢編項(xiàng): 現(xiàn)代生物技術(shù)譯叢
標(biāo) 簽: 醫(yī)用生物學(xué)

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ISBN: 9787030071866 出版時(shí)間: 1999-07-01 包裝: 精裝
開(kāi)本: 26cm 頁(yè)數(shù): 279頁(yè) 字?jǐn)?shù):  

內(nèi)容簡(jiǎn)介

  為適應(yīng)生命科學(xué)發(fā)展的需要,自1989年以來(lái),著名的美國(guó)冷泉港實(shí)驗(yàn)室每年舉辦一期"蛋白質(zhì)純化與鑒定研習(xí)班",本書(shū)即是在其講稿的基礎(chǔ)上形成的。全書(shū)分4個(gè)單元,分別以鈣調(diào)蛋白、轉(zhuǎn)錄因子AP-1、重組和胰島素受體為例,從不同的原材料出發(fā),通過(guò)一組具有代表性的并經(jīng)多年優(yōu)化的純化和鑒定實(shí)驗(yàn),具體地介紹現(xiàn)代生物學(xué)和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中一系列常用的蛋白質(zhì)純化與鑒定技術(shù);對(duì)每個(gè)實(shí)驗(yàn)均詳細(xì)敘述其材料設(shè)備、試劑配制、操作程序和注意事項(xiàng)等。書(shū)后附錄對(duì)若干重要的通用技術(shù)作了補(bǔ)充介紹。本書(shū)可供分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、微生物學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué),以及醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)等領(lǐng)域的科研和教學(xué)人員參考,是實(shí)驗(yàn)室的必備工具書(shū)。

作者簡(jiǎn)介

暫缺《蛋白質(zhì)純化與鑒定實(shí)驗(yàn)指南》作者簡(jiǎn)介

圖書(shū)目錄


前言
緒論
如何使用本指南
第1單元鈣調(diào)蛋白的純化
實(shí)驗(yàn)1活性測(cè)定:鈣調(diào)蛋白組分的活性測(cè)定
實(shí)驗(yàn)2組織提取物的制備
實(shí)驗(yàn)3粗分級(jí)分離
實(shí)驗(yàn)4離子交換層析
實(shí)驗(yàn)5疏水作用層析
實(shí)驗(yàn)6鈣調(diào)蛋白的鑒定:收率的計(jì)算
實(shí)驗(yàn)7鈣調(diào)蛋白的鑒定:電泳
實(shí)驗(yàn)8蛋白質(zhì)的裂解消化
實(shí)驗(yàn)9反相高效液相色譜
實(shí)驗(yàn)10鈣調(diào)蛋白的物理分析
實(shí)驗(yàn)11鈣調(diào)蛋白的化學(xué)分析
試劑的配制
第2單元Hela細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子AP-1的純化
實(shí)驗(yàn)1Hela細(xì)胞核提取物的制備
實(shí)驗(yàn)2SephacryS-300HR凝膠過(guò)濾層析
實(shí)驗(yàn)3序列特異性DNA親和層析
實(shí)驗(yàn)4DNA酶I足跡分析
實(shí)驗(yàn)5凝膠遷移變動(dòng)分析
實(shí)驗(yàn)6肝素-SepharoseCL-2B的制備
試劑的配制
參考文獻(xiàn)
第3單元大腸桿菌中過(guò)表達(dá)重組蛋白的純化
實(shí)驗(yàn)1大腸桿菌細(xì)胞的破碎和包涵體的配制
實(shí)驗(yàn)2包涵體沉淀的溶解.重折疊和離子交換層析
實(shí)驗(yàn)3可溶性提取物的聚乙烯亞胺沉淀和免疫親和層析
實(shí)驗(yàn)4定量測(cè)定與制備小結(jié)
實(shí)驗(yàn)5蛋白質(zhì)的鑒定
方案補(bǔ)充實(shí)驗(yàn):從過(guò)表達(dá)細(xì)菌提純
試劑的配制
參考文獻(xiàn)
第4單元鼠肝胰島素受體的溶解與純化
實(shí)驗(yàn)1大鼠肝臟質(zhì)膜的分離
實(shí)驗(yàn)2膜胰島素受體的溶解
實(shí)驗(yàn)3溶解受體的凝集素親和層析
實(shí)驗(yàn)4部分純化受體的胰島素親和層析
實(shí)驗(yàn)5胰島素受體與胰島素的交聯(lián)
實(shí)驗(yàn)6胰島素激素的胰島素受體自磷酸化
實(shí)驗(yàn)7胰島素受體糖基化的分析
試劑的配制
參考文獻(xiàn)
附錄
附錄1pH的測(cè)量
附錄2緩沖液的配制
附錄3電導(dǎo)率的測(cè)量
附錄4固態(tài)硫酸銨法分級(jí)分離
附錄5蛋白質(zhì)的SDS-PAGE電泳
附錄6蛋白質(zhì)的過(guò)甲酸氧化
附錄7用亞氨基二乙酸Sepharose6B分離磷酸肽
附錄8蛋白質(zhì)內(nèi)序分析用肽段的分離與純化
附錄9推薦讀物
技術(shù)索引
主題索引

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