蛋白折疊液相色譜法

前言
第一章 緒論
§1．1 蛋白折疊液相色譜法的定義
§1．2 蛋白折疊液相色譜法的特色
§1．3 發(fā)展史
§1．4 本書的內(nèi)容
參考文獻(xiàn)
第二章 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與構(gòu)象變化
§2．1 概述
§2．2 蛋白質(zhì)分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)
§2．3 蛋白質(zhì)分子的空間結(jié)構(gòu)
2．3．1 蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)
2．3．2 超二級(jí)結(jié)構(gòu)
2．3．3 結(jié)構(gòu)域
2．3．4 三級(jí)結(jié)構(gòu)
2．3．5 四級(jí)結(jié)構(gòu)
§2．4 穩(wěn)定蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的作用力
§2．5 蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的研究方法
2．5．1 X射線衍射結(jié)構(gòu)分析法
2．5．2 圓二色性光譜法
2．5．3 紫外差示光譜法
2．5．4 熒光光譜法
2．5．5 激光拉曼光譜法
2．5．6 氫同位素交換法
2．5．7 核磁共振法
參考文獻(xiàn)
第三章 液相色譜對(duì)生物大分子構(gòu)象變化的表征
§3．1 概述
§3．2 液相色譜中的計(jì)量置換保留理論
§3．3 Z和lgI對(duì)生物大分子構(gòu)象變化的表征
§3．4 RPLC中Z和lgI對(duì)生物大分子構(gòu)象變化的表征
3．4．1 Z值與蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量
3．4．2 蛋白質(zhì)構(gòu)象的始末狀態(tài)
3．4．3 RPLC中甲酸濃度與生物大分子的構(gòu)象變化
3．4．4 Z值與離子對(duì)試劑
3．4．5 蛋白質(zhì)熱變性的表征
3．4．6 RPLC中Z對(duì)白細(xì)胞介素-2突變蛋白分子的構(gòu)象變化的表征
3．4．7 不同變性態(tài)條件下Lys的構(gòu)象表征
3．4．8 在RPLC中人工交聯(lián)修飾蛋白保留行為及其Z和lgI值的表征
3．4．9 重組人干擾素-r在有孔與無(wú)孔反相硅膠固定相上保留行為的比較
§3．5 HIC中蛋白分子構(gòu)象的Z表征
3．5．1 HIC中在變性劑存在條件下z值的準(zhǔn)確測(cè)定方法
3．5．2 脲濃度與蛋白質(zhì)分子構(gòu)象變化的z表征
3．5．3 胍濃度與蛋白質(zhì)分子構(gòu)象變化的Z表征
3．5．4 Z和lgI值的測(cè)定精度
§3．6 離子交換色譜中蛋白分子構(gòu)象Z和lgI的表征
3．6．1 IEC中變性蛋白與Z和lgI值的測(cè)定
3．6．2 不同變性狀態(tài)下Lys的弱陽(yáng)離子交換色譜保留
3．6．3 不同脲濃度下Lys與z值
3．6．4 Z對(duì)還原變性Lys活性回收率隨脲濃度變化趨勢(shì)
3．6．5 Z對(duì)Lys分子構(gòu)象變化的定量表征
3．6．6 lgI對(duì)Lys分子構(gòu)象變化的定量表征
3．6．7 不同構(gòu)象Lys分子與固定相的親和力
參考文獻(xiàn)
第四章 蛋白折疊
§4．1 概述
§4．2 包涵體
4．2．1 包涵體的特性及其形成原因
4．2．2 包涵體蛋白質(zhì)的生產(chǎn)程序
4．2．3 包涵體的分離和純化
4．2．4 包涵體的溶解
4．2．5 包涵體蛋白的復(fù)性
4．2．6 蛋白折疊的發(fā)展近況
§4．3 蛋白質(zhì)的變性
§4．4 蛋白質(zhì)的失活
§4．5 蛋白折疊中間體的研究
§4．6 蛋白折疊機(jī)理
4．6．1 熱力學(xué)模型
4．6．2 動(dòng)力學(xué)模型
4．6．3 蛋白多肽鏈折疊的模型介紹
§4．7 蛋白質(zhì)的復(fù)性方法
4．7．1 稀釋法
4．7．2 透析法
4．7．3 超濾法
4．7．4 新發(fā)展的復(fù)性方法
參考文獻(xiàn)
第五章 液相色譜法對(duì)變性蛋白的折疊
§5．1 概述
§5．2 各種LC復(fù)性的熱力學(xué)基礎(chǔ)-化學(xué)平衡
§5．3 排阻色譜
5．3．1 SEC復(fù)性的原理
5．3．2 SEC復(fù)性的影響因素
5．3．3 SEC復(fù)性方法的改進(jìn)
5．3．4 SEC復(fù)性法的應(yīng)用
5．3．5 重組人粒細(xì)胞集落刺激因子的SEC復(fù)性
§5．4 離子交換色譜
5．4．1 用弱陽(yáng)離子交換色譜法復(fù)性溶菌酶
5．4．2 用強(qiáng)陰離子交換色譜法(SAX)復(fù)性并同時(shí)純化rhG-CSF
§5．5 親和色譜
§5．6 疏水相互作用色譜
§5．7 各種LC復(fù)性方法的比較
§5．8 HPHIC對(duì)變性蛋白的折疊與復(fù)性舉例
5．8．1 HPHIC對(duì)非還原變性蛋白的復(fù)性
5．8．2 HPHIC對(duì)還原變性牛胰島素的折疊
5．8．3 HPHIC純化并同時(shí)復(fù)性E．coli如表達(dá)的重組牛朊病毒正常蛋白片斷
5．8．4 HPHIC對(duì)還原變性溶菌酶的復(fù)性
§5．9 HPHIC進(jìn)行蛋白折疊的分子學(xué)機(jī)理
5．9．1 變性蛋白在HPHIC固定相上的吸附及微區(qū)的形成——固定相對(duì)蛋白折疊的貢獻(xiàn)
5．9．2 流動(dòng)相對(duì)蛋白折疊的貢獻(xiàn)
5．9．3 HPIHIC固定相和流動(dòng)相的協(xié)同作用在蛋白折疊過(guò)程中的作用
5．9．4 HPHIC法折疊蛋白與“人工分子伴侶”
§5．10 影響HPHIC對(duì)蛋白復(fù)性的因素
5．10．1 固定相
5．10．2 流動(dòng)相
5．10．3 色譜條件
§5．11 用LC法對(duì)蛋白復(fù)性的展望
參考文獻(xiàn)
第六章 液一固界面上變性蛋白折疊自由能的測(cè)定
§6．1 概述
§6．2 液一固界面上蛋白折疊自由能測(cè)定的理論基礎(chǔ)
§6．3 蛋白折疊自由能的測(cè)定
6．3．1 不同濃度變性劑存在下蛋白質(zhì)的lgj和Z值
6．3．2 液一固界面上蛋白折疊自由能的測(cè)定
§6．4 蛋白折疊途徑中能壘與能阱
6．4．1 能壘和能阱的定義
6．4．2 蛋白折疊途徑中的能量表征
6．4．3 蛋白活性與△△Gf
參考文獻(xiàn)
第七章 變性蛋白復(fù)性與同時(shí)純化裝置
§7．1 概述
§7．2 短柱理論
7．2．1 短柱理論表達(dá)式的推導(dǎo)
7．2．2 短柱對(duì)生物大分子的分離效果
§7．3 色譜餅——變性蛋白復(fù)性與同時(shí)純化裝置
7．3．1 色譜餅的性能
7．3．2 不同規(guī)格色譜餅對(duì)標(biāo)準(zhǔn)蛋白的色譜分離
§7．4 色譜餅用于蛋白復(fù)性與同時(shí)純化
7．4．1 色譜餅對(duì)核糖核酸酶A和溶菌酶的復(fù)性及同時(shí)分離
7．4．2 人血清白蛋白的快速純化
7．4．3 用色譜餅純化蛋清中溶菌酶
§7．5 快速蛋白純化色譜柱
7．5．1 快速蛋白純化柱的形狀及結(jié)構(gòu)
7．5．2 色譜柱的柱壓
7．5．3 疏水型快速蛋白純化柱對(duì)標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分離
7．5．4 離子交換型快速蛋白純化柱對(duì)標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分離
7．5．5 柱壽命的測(cè)定
7．5．6 快速蛋白純化柱質(zhì)量負(fù)載的測(cè)定
§7．6 應(yīng)用舉例
7．6．1 疏水型快速蛋白純化柱對(duì)變性溶菌酶的復(fù)性
7．6．2 快速蛋白純化柱對(duì)豬心中細(xì)胞色素c的純化
7．6．3 快速蛋白純化柱對(duì)粗曠淀粉酶的純化
7．6．4 疏水型快速蛋白純化柱對(duì)重組人干擾素-r的復(fù)性與同時(shí)純化
§7．7 蛋白質(zhì)復(fù)性及同時(shí)純化的策略
7．7．1 用HIC復(fù)性蛋白的一般策略
7．7．2 用IEC復(fù)性蛋白的一般策略
參考文獻(xiàn)
第八章 重組蛋白藥物的復(fù)性與同時(shí)純化及其工業(yè)化生產(chǎn)舉例
§8．1 概述
§8．2 重組蛋白藥物的復(fù)性與同時(shí)純化
8．2．1 蛋白質(zhì)復(fù)性及同時(shí)純化裝置對(duì)IL-2-Ang復(fù)性
8．2．2 重組人胰島素原的復(fù)性及同時(shí)純化
8．2．3 對(duì)某大學(xué)重組蛋白樣品的純化
8．2．4 蛋白質(zhì)復(fù)性及同時(shí)純化裝置對(duì)rhG-CSF復(fù)性
8．2．5 重組人干細(xì)胞因子的復(fù)性并同時(shí)純化
8．2．6 SAX型快速蛋白純化柱對(duì)重組人粒細(xì)胞一巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的復(fù)性并同時(shí)純化
8．2．7 在工業(yè)上用疏水相互作用色譜復(fù)性和純化干擾素-r
8．2．8 膨脹床色譜用于蛋白復(fù)性
8．2．9 模擬移動(dòng)床用于蛋白復(fù)性
8．2．10 連續(xù)環(huán)狀色譜復(fù)性
參考文獻(xiàn)
第九章 典型實(shí)驗(yàn)
§9．1 色譜餅的使用
§9．2 科林快速蛋白純化柱的測(cè)試
§9．3 實(shí)驗(yàn)一科林快速蛋白純化柱柱效的檢測(cè)
§9．4 實(shí)驗(yàn)二科林快速蛋白純化柱對(duì)豬心中細(xì)胞色素c的分離與純化
§9．5 實(shí)驗(yàn)三科林快速蛋白純化柱對(duì)變性溶菌酶和核糖核酸酶復(fù)性與同時(shí)純化
§9．6 實(shí)驗(yàn)四科林快速蛋白純化柱對(duì)重組人干擾素-r的復(fù)性及同時(shí)純化
§9．7 實(shí)驗(yàn)五色譜餅對(duì)標(biāo)準(zhǔn)蛋白分離性能的檢測(cè)
§9．8 實(shí)驗(yàn)六科林快速蛋白純化柱對(duì)還原變性溶菌酶的復(fù)性