生物化學實驗

第一篇 生物化學實驗室規(guī)則及基本操作
1 實驗室規(guī)則
2 預習報告要求
3 實驗記錄要求
4 實驗報告書寫要求及參考格式
4.1 實驗報告的格式
4.2 實驗報告的內(nèi)容
4.3 實驗結(jié)果
5 儀器的清洗與清潔
5.1 初用玻璃儀器的清洗
5.2 使用過的玻璃儀器的清洗
5.3 石英和玻璃比色皿的清洗
5.4 塑料器皿的清洗
5.5 玻璃和塑料器皿的干燥
6 清洗液的配制及使用
6.1 鉻酸洗液的配制
6.2 其他洗滌液
7 移液器的種類和使用
7.1 滴管
7.2 移液管（吸管）
7.3 微量進樣器
7.4 自動取液器
8 定量容器的種類和使用
8.1 量筒、量杯
8.2 容量瓶
9 溶液的混勻
9.1 攪拌
9.2 旋轉(zhuǎn)
9.3 彈打
10 實驗室意外情況及處理措施
10.1 著火
10.2 爆炸
10.3 中毒
10.4 外傷
10.5 觸電
第二篇 基本生化實驗技術(shù)
1 分光光度技術(shù)
1.1 紫外和可見光光譜
1.2 熒光光度分析
1.3 原子吸收光譜
2 電泳技術(shù)
2.1 電泳技術(shù)總論
2.2 紙電泳和乙酸纖維薄膜電泳
2.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳
2.4 瓊脂糖凝膠電泳
2.5 免疫電泳
2.6 等電聚焦電泳
2.7 毛細管電泳
2.8 電泳結(jié)果處理
3 色譜技術(shù)
3.1 色譜技術(shù)概述
3.2 凝膠色譜
3.3 離子交換色譜
3.4 親和色譜
3.5 具體的一些色譜方法
3.6 高效液相色譜
4 PCR技術(shù)
4.1 PCR基本原理
4.2 PCR的基本過程
4.3 PCR實驗技術(shù)要點
4.4 提高PCR擴增特異性
5 膜分離技術(shù)
5.1 透析
5.2 超濾
6 免疫技術(shù)——酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）
6.1 原理
6.2 操作要點
7 生物大分子制備技術(shù)
7.1 概述
7.2 生物大分子制備的前處理
7.3 生物大分子的分離純化
7.4 樣品的保存
第三篇 實驗部分
第一部分 糖類實驗
實驗一 還原糖和總糖的測定（3，5-二硝基水楊酸法）
實驗二 可溶性總糖的蒽酮比色法測定
實驗三 費林試劑法測定總糖
實驗四 磷鉬酸比色法測定血糖
實驗五 黏多糖——肝素鈉效價的測定
實驗六 淀粉的提取及性質(zhì)實驗
實驗七 淀粉與纖維素的測定
實驗八 肝糖原的提取及鑒定
實驗九 果膠的提取與膠凍的制備
實驗十 可溶性糖的硅膠G薄層色譜
實驗十一 糖的聚酰胺薄層色譜
實驗十二 細菌細胞壁糖的薄層色譜
實驗十三 葡萄糖-1-磷酸的制備及其純度的測定
第二部分 脂類實驗
實驗十四 脂肪的堿水解及組分鑒定
實驗十五 粗脂肪的定量測定——索氏抽提法
實驗十六 皂化值的測定
實驗十七 酸值的測定
實驗十八 碘值的測定
實驗十九 卵磷脂的提取及鑒定
實驗二十 磷硫鐵法測定血清膽固醇
實驗二十一 分光光度法測定膽紅素（改良J-G法）
實驗二十二 紅細胞膜的制備及其成分分析（磷脂、膽固醇）
第三部分 氨基酸和蛋白質(zhì)類實驗
實驗二十三 氨基酸的紙色譜
實驗二十四 薄層色譜法分離氨基酸
實驗二十五 甲醛滴定法測定氨基酸
實驗二十六 華勃氏呼吸計法測定L-谷氨酸
實驗二十七 旋光法測定谷氨酸
實驗二十八 蛋白質(zhì)的沉淀反應、顏色反應、兩性反應、電荷及等電點的測定
實驗二十九 粗蛋白的定量測定——微量凱氏定氮法
實驗三十 紫外光吸收法測定蛋白質(zhì)含量
實驗三十一 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量
實驗三十二 考馬斯亮藍G-250法（Bradford法）測定蛋白質(zhì)含量
實驗三十三 Fo1in-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質(zhì)
實驗三十四 尿素對蛋白質(zhì)的變性作用
實驗三十五 蛋白質(zhì)DNS分析法（DNS-C1膜色譜技術(shù)）
實驗三十六 乙酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白質(zhì)
實驗三十七 垂直板聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)
實驗三十八 等電聚焦電泳測定蛋白質(zhì)等電點
實驗三十九 SDS-PAGE電泳測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量
實驗四十 凝膠色譜法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量
實驗四十一 酪蛋白的提取
實驗四十二 植物葉蛋白的提取
實驗四十三 細胞色素C的制備及其測定
第四部分 核酸類實驗
實驗四十四 質(zhì)粒DNA的堿裂解法提取與純化
實驗四十五 植物組織中核酸的提取和測定
實驗四十六 酵母RNA的分離與組分鑒定
實驗四十七 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗四十八 RNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳
實驗四十九 DNA重組
實驗五十 PCR聚合酶擴增DNA
實驗五十一 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶（PCR）鏈反應
第五部分 酶類實驗
實驗五十二 過氧化氫酶和過氧化物酶的作用
實驗五十三 溫度、pH、激活劑和抑制劑對唾液淀粉酶活性的影響
實驗五十四 大麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較
實驗五十五 枯草桿菌蛋白酶活力的測定
實驗五十六 轉(zhuǎn)氨酶GPT、GOT活性的測定
實驗五十七 脲酶的動力學研究
實驗五十八 糖化型淀粉酶活力的測定
實驗五十九 蛋清溶菌酶的制備及活力測定
實驗六十 正交法測定對酶活力影響的幾種因素
實驗六十一 堿性磷酸酶的分離與純化
實驗六十二 結(jié)晶乳酸脫氫酶（LDH）的制備
實驗六十三 琥珀酸脫氫酶的活性測定及丙二酸的抑制作用
實驗六十四 辣根過氧化物酶的制備及酶比活力的測定
實驗六十五 發(fā)色底物測定大曲中α-葡萄糖苷酶活力
實驗六十六 酵母蔗糖酶的純化及性質(zhì)研究
實驗六十七 固定化酵母細胞及蔗糖酶的檢測
實驗六十八 親和色譜法純化胰蛋白酶
第六部分 維生素類實驗
實驗六十九 維生素A的測定（三氯化銻比色法）
實驗七十 還原型維生素C的測定
實驗七十一 總維生素C的測定——2，4-二硝基苯肼比色法
實驗七十二 熒光法測定維生素B2（核黃素）
實驗七十三 高效液相色譜法測定脂溶性維生素
第七部分 代謝類實驗
實驗七十四 肌糖原的酵解作用
實驗七十五 發(fā)酵過程中無機磷的利用
實驗七十六 糖酵解中間產(chǎn)物的鑒定
實驗七十七 氨基轉(zhuǎn)移反應的定性鑒定
實驗七十八 脂肪酸的β-氧化
第八部分 其他實驗
實驗七十九 辛酸一硫酸銨法從人血清中純化免疫球蛋白（IgG）
實驗八十 免疫電泳技術(shù)
實驗八十一 ELISA法測定單克隆抗體的效價
實驗八十二 分光光度法測定葉綠素含量
附錄
附錄1 一些常用化合物的溶解度（20℃）
附錄2 酸、堿溶液的配制
附錄3 常用酸堿體積分數(shù)、相對密度和物質(zhì)的量濃度的關(guān)系
附錄4 某些有機溶劑的主要物理常數(shù)
附錄5 一些常用酸堿指示劑
附錄6 混合指示劑
附錄7 氧化還原染料
附錄8 染料和熒光標準試劑
附錄9 生物發(fā)色團
附錄10 某些重要生化物質(zhì)的摩爾消光系數(shù)
附錄11 氨基酸的一些物理常數(shù)
附錄12 元素的相對原子質(zhì)量表
附錄13 調(diào)整硫酸銨溶液飽和度計算表（25℃）
附錄14 調(diào)整硫酸銨溶液飽和度計算表（0℃）
附錄15 氣體干燥劑
附錄16 液體干燥劑
附錄17 易變質(zhì)及需要特殊方法保存的試劑
附錄18 冷卻劑
附錄19 常用緩沖溶液的配制
參考書目