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生物文庫(kù)技術(shù):噬菌體展示與SELEX技術(shù)

生物文庫(kù)技術(shù):噬菌體展示與SELEX技術(shù)

定 價(jià):¥28.00

作 者: 邵寧生,楊光,房濤 主編
出版社: 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社
叢編項(xiàng):
標(biāo) 簽: 微生物學(xué)

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ISBN: 9787802450691 出版時(shí)間: 2011-10-01 包裝: 平裝
開(kāi)本: 16開(kāi) 頁(yè)數(shù): 144 字?jǐn)?shù):  

內(nèi)容簡(jiǎn)介

  噬菌體展示技術(shù)和SELEX技術(shù)是生物文庫(kù)技術(shù)中最常用的兩種技術(shù)。噬菌體展示技術(shù)是將外源蛋白的基因型與表型聯(lián)系在一起,通過(guò)篩選可以將展示特異性外源蛋白多肽的噬菌體從表達(dá)有各種外源蛋白的噬菌體庫(kù)中篩選出來(lái),經(jīng)擴(kuò)增可以得到上千倍乃至108倍的富集。獲得的靶(分)子特異結(jié)合肽在拮抗肽篩選、抗體抗原表位鑒定方面十分有用。SELEX技術(shù)是應(yīng)用大容量的人工合成隨機(jī)寡核苷酸庫(kù),結(jié)合PCR體外擴(kuò)增技術(shù),以指數(shù)級(jí)富集與靶(分)子特異結(jié)合的寡核苷酸適配體(aptamer)的方法。由于獲得的aptamer具有高特異性、高親和力,在特異分子標(biāo)志物篩選及靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)方面具有獨(dú)到優(yōu)勢(shì)。目前,噬菌體展示和SELEX技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、藥物篩選、疫苗及診斷試劑的研制等方面,具有很好的應(yīng)用前景?!渡镂膸?kù)技術(shù):噬菌體展示與SELEX技術(shù)》作者經(jīng)過(guò)多年努力,建立和改良了多種噬菌體展示和SELEX技術(shù)平臺(tái),并利用上述技術(shù)平臺(tái)開(kāi)展了針對(duì)感染、炎癥、腫瘤和生物毒素等方面的新型診斷或治療藥物以及基礎(chǔ)方面的研究,取得了良好的結(jié)果。此書(shū)是根據(jù)作者實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn),結(jié)合具體篩選實(shí)例編寫(xiě)而成,特別編入作者的經(jīng)驗(yàn)借鑒與注意事項(xiàng),為讀者提供了較詳盡的參考技術(shù)路線和具體操作方法,盡量使具有一定生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)的科技人員能夠快速掌握噬茵體展示和SELEX技術(shù)。

作者簡(jiǎn)介

暫缺《生物文庫(kù)技術(shù):噬菌體展示與SELEX技術(shù)》作者簡(jiǎn)介

圖書(shū)目錄

上篇  噬菌體表面展示技術(shù)原理及其操作指南
 第1章  概述
   一、噬菌體表面展示隨機(jī)肽庫(kù)
   二、噬菌體抗體庫(kù)
   三、噬菌體表面展示技術(shù)篩選原理和基本方法
   四、噬菌體表面展示技術(shù)的應(yīng)用
 第2章  噬菌體表面展示肽庫(kù)技術(shù)操作指南
   一、試劑
   二、實(shí)驗(yàn)步驟
   三、影響篩選的因素
   四、結(jié)果判斷和分析
 第3章  噬菌體肽庫(kù)構(gòu)建及篩選實(shí)例
   實(shí)例1  基于昆蟲(chóng)防御素A蛋白分子的噬菌體展示構(gòu)象肽庫(kù)的構(gòu)建
   實(shí)例2  重組hTNF-α結(jié)合肽的篩選
   實(shí)例3  馬抗SARS-CoV多抗抗原表位的篩選
 第4章  噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)操作指南
   一、試劑
   二、實(shí)驗(yàn)步驟
   三、影響篩選的因素
 第5章  噬菌體抗體庫(kù)構(gòu)建及篩選實(shí)例
   一、引物
   二、淋巴細(xì)胞總RNA的提取及VH和VL基因的擴(kuò)增
   三、初級(jí)噬菌體抗體庫(kù)的構(gòu)建
   四、通過(guò)Cre-loxP位點(diǎn)特異性重組構(gòu)建大容量噬菌體抗體庫(kù)
   五、噬菌體抗體庫(kù)的篩選
   六、噬菌體抗體的鑒定及序列分析
下篇  SELEX技術(shù)原理及其操作指南
 第1章  概述
   一、SELEX技術(shù)的基本技術(shù)路線
   二、SELEX篩選的特點(diǎn)
   三、SELEX的應(yīng)用
   四、適配子的改造
 第2章  SELEX技術(shù)操作指南
   一、試劑與設(shè)備
   二、文庫(kù)/文庫(kù)模板和引物的設(shè)計(jì)與合成
   三、RNA文庫(kù)的獲得(PCR、體外轉(zhuǎn)錄與RNA回收)
   四、文庫(kù)與靶分子孵育
   五、結(jié)合寡核苷酸分子的分離
   六、反轉(zhuǎn)錄
   七、PCR
   八、下一輪篩選用文庫(kù)的制備
   九、重復(fù)篩選
   十、篩選后獲得的特異aptamer的分析
 第3章  SELEX技術(shù)篩選實(shí)例
   實(shí)例1  牛凝血酶特異的RNA aptamer的篩選
   實(shí)例2  CE-SELEX篩選技術(shù)
   實(shí)例3  親和層析SELEX篩選促紅細(xì)胞生成素適配體及基于分子信標(biāo)檢測(cè)方法的建立
   實(shí)例4  親和層析SELEX篩選相思子毒素適配體及其在分析檢測(cè)中的應(yīng)用
   實(shí)例5  以完整細(xì)胞為靶的消減SELEX篩選
   實(shí)例6  腫瘤組織切片-SELEX技術(shù)篩選臨床標(biāo)本分子探針
   實(shí)例7  組合aptamer用于金黃色葡萄球菌檢測(cè)的研究

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