生物工程綜合性與設計性實驗

前言
第一部分基礎知識與研究方法
第1章實驗基礎知識1
1實驗室基礎知識1
1.1實驗室守則1
1.2實驗室安全知識1
1.3實驗室事故的預防2
1.4實驗事故的處理方法3
2實驗方案設計基礎知識3
2.1實驗設計的意義3
2.2實驗設計的要素4
2.3實驗設計的原則5
2.4實驗設計的常用方法5
2.5實驗設計的程序6
3實驗記錄的基礎知識7
3.1實驗記錄的書寫要求7
3.2實驗記錄書寫的基本要求8
3.3實驗記錄的基本內(nèi)容8
3.4實驗記錄需注意的問題9
4實驗數(shù)據(jù)基礎知識10
4.1實驗數(shù)據(jù)的獲取10
4.2實驗數(shù)據(jù)處理與分析10
第2章綜合性與設計性實驗研究思路與方法13
1綜合性實驗、設計性實驗的概述13
1.1實驗的分類及基本內(nèi)涵13
1.2綜合性實驗的內(nèi)涵13
1.3設計性實驗的內(nèi)涵13
1.4綜合性與設計性實驗在人才培養(yǎng)中的地位及作用14
2綜合性與設計性實驗的開設原則及基本要求14
2.1綜合性與設計性實驗開設的原則14
2.2綜合性與設計性實驗開設的基本要求15
3綜合性與設計性實驗的基本步驟15
3.1選題15
3.2方案設計15
3.3實驗準備16
3.4預備實驗16
3.5正式實驗16
3.6數(shù)據(jù)處理與結果分析16
3.7撰寫研究報告16
3.8各實驗小組匯報16
第二部分生物活性物質(zhì)提取和分離
第3章綜合性實驗17
實驗1纖維素酶輔助法提取桐花樹中沒食子酸的工藝研究17
實驗2槐米中蕓香苷的提取、分離與鑒定 19
實驗3漢防己生物堿的提取、分離與鑒定22
實驗4大黃中蒽醌類成分的提取、分離與鑒定24
實驗5茶葉中咖啡因的提取、分離與鑒定26
實驗6茶葉中茶多酚類物質(zhì)的提取與含量測定28
實驗7植物組織中天然色素的提取、分離與含量測定30
實驗8陰香果實花色苷粗提物大孔吸附樹脂純化技術研究31
實驗9植物組織中總黃酮的超聲波提取優(yōu)化34
實驗10金柚皮中總黃酮的提取與含量測定36
實驗11柚皮香精的提取與鑒定38
實驗12酪蛋白磷酸肽的制備及純化40
實驗13番木瓜中鞣質(zhì)的超聲波提取優(yōu)化42
實驗14大豆分離蛋白的制備及性質(zhì)分析45
第4章設計性實驗48
實驗15柚皮提取分離果膠48
實驗16植物性多糖的制備及效果研究49
實驗17微波輔助法對番木瓜果膠的提取優(yōu)化50
實驗18穗花杉樹皮中紫杉醇的提取、分離與含量測定51
實驗19苦丁茶中熊果酸的提取、分離與含量測定52
實驗20植物揮發(fā)油的提取與含量測定53
實驗21原花青素的提取與精制54
實驗22陰香果實花色苷體外抗氧化活性研究55
實驗23不同藥食兩用植物抗氧化能力的比較57
實驗24玉米蛋白粉制備抗氧化肽及其抗氧化特性的分析57
實驗25天然植物色素提取及其穩(wěn)定性研究59
實驗26植物色素的提取及抑菌作用研究60
實驗27蛋白質(zhì)不同測定方法的對比61
實驗28植物組織中維生素C含量測定方法的比較研究62
第三部分分子生物學與基因工程
第5章綜合性實驗64
實驗29植物總DNA的提取(CATB法)、純化和檢測64
實驗30堿裂解法提取質(zhì)粒DNA66
實驗31動物肝臟組織總RNA(Trizol法)提取與鑒定69
實驗32RTPCR及電泳檢測71
實驗33大腸桿菌感受態(tài)的制備、質(zhì)粒DNA的轉化及陽性克隆的篩選72
實驗34根癌農(nóng)桿菌介導的擬南芥花序浸潤轉基因75
實驗35水稻磷酸酯酶2A基因的原核表達及鑒定77
實驗36羅非魚體內(nèi)不同組織器官脂蛋白酯酶(LPL)基因表達分析79
實驗37限制性內(nèi)切核酸酶消化及產(chǎn)物鑒定81
實驗38rDNAITS序列分析及物種鑒定83
第6章設計性實驗87
實驗39不同實驗方法提取植物組織中基因組DNA效果的比較87
實驗40PCR技術檢測火腿腸中肉類的種屬來源88
實驗41地方土豬氟烷基因發(fā)生率的調(diào)查89
實驗42PCR技術在食品轉基因檢測中的應用90
實驗43基于線粒體COⅠ的DNA條形碼技術對家禽的種類進行鑒定91
實驗44豬瘟病毒Southern印跡雜交技術的診斷92
實驗45采用PCR法對目的基因進行定點突變93
實驗46人胰島素基因的原核表達94
實驗47羅非魚溶菌酶基因在大腸桿菌中的誘導表達及產(chǎn)物鑒定96
實驗48β地中海貧血的基因診斷——PCRRFLP分析97
生物工程綜合性與設計性實驗
第四部分細 胞 工 程
第7章綜合性實驗99
實驗49大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的體外分離培養(yǎng)99
實驗50動物細胞生長曲線的測定101
實驗51動物細胞的凍存與復蘇102
實驗52大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞表面標志的檢測和成骨誘導分化104
實驗53利用脂質(zhì)體轉染技術對HeLa細胞中重組GFP進行觀察106
實驗54雞紅細胞與HeLa細胞的融合實驗108
實驗55小鼠精子的采集、運動能力檢測及體外獲能109
實驗56雞蛋的人工孵化和胚胎發(fā)育過程觀察111
實驗57植物細胞原生質(zhì)體化與細胞壁再生113
實驗58植物愈傷組織的誘導與分化115
第8章設計性實驗117
實驗59小鼠胚胎干細胞的體外培養(yǎng)與鑒定117
實驗60小鼠胚胎干細胞向心肌細胞的體外誘導分化118
實驗61細胞凋亡的誘導及其檢測118
實驗62小鼠卵母細胞體外受精及受精卵的體外培養(yǎng)119
實驗63聚乙二醇誘導細胞融合最適條件的探究120
實驗64紅豆杉細胞懸浮培養(yǎng)與次生代謝產(chǎn)物誘導121
實驗65人工種子的設計與構建123
實驗66離體植物細胞對外界刺激的響應124
實驗67植物快速無性繁殖方案探索125
實驗68水稻單倍體培養(yǎng)126
第五部分酶工程第9章綜合性實驗128
實驗69影響酶活力的因素——正交試驗法128
實驗70胰蛋白酶米氏常數(shù)的測定131
實驗71蔗糖酶的制備、各級分活性及蛋白質(zhì)含量的測定133
實驗72糖化酶反應動力學性質(zhì)的測定137
實驗73豬胰蛋白酶的制備及活力測定139
實驗74植物體內(nèi)α淀粉酶與β淀粉酶活力的測定143
實驗75血液中乙酰膽堿酯酶的分離純化及活力的測定145
實驗76殼聚糖凝膠顆粒固定化淀粉酶146
實驗77固定化谷氨酸脫羧酶的制備與酶學性質(zhì)研究148
實驗78低分子肝素修飾超氧化物歧化酶及穩(wěn)定性檢驗151
第10章設計性實驗153
實驗79不同植物SOD提取及抗氧化活力測定153
實驗80木瓜蛋白酶的提取制備154
實驗81植物細胞應激過程中有關酶活力變化155
實驗82產(chǎn)蛋白酶和淀粉酶芽孢桿菌的分離及產(chǎn)酶條件的優(yōu)化156
實驗83枯草桿菌堿性磷酸酶生物合成的誘導與阻遏作用157
實驗84微生物多酚氧化酶酶源篩選及其在茶黃素合成中的應用158
實驗85酶法輔助制備柚果汁159
實驗86酶法輔助提取植物中黃酮類物質(zhì)160
實驗87酶法改善糙米食用品質(zhì)161
實驗88酶法制備大豆多肽及其抗氧化特性的研究162
第六部分發(fā) 酵 工 程
第11章綜合性實驗164
實驗89高產(chǎn)抗菌活性物質(zhì)菌株的紫外線誘變育種164
實驗90小型發(fā)酵罐好氧發(fā)酵與過程控制168
實驗91抗霉菌拮抗菌株發(fā)酵液中抗菌物質(zhì)的提取與精制173
實驗92產(chǎn)乳酸芽孢桿菌的培養(yǎng)177
第12章設計性實驗180
實驗93發(fā)酵食品的制備180
實驗94產(chǎn)酶菌株的分離篩選及其生物學初步實驗181
實驗95抗真菌拮抗菌株的分離篩選及生物學初步實驗183
實驗96產(chǎn)清除自由基活性物質(zhì)菌株的分離篩選及生物學初步實驗185
主要參考文獻188
附錄190前言